【知识库】为什么GPC需要光散射？

凝胶渗透色谱（GPC），又称尺寸排除色谱（SEC），是一种使用特殊的色谱柱、按照尺寸大小分离天然与合成高分子、生物高分子的色谱技术。

GPC 色谱的操作原理是利用分子的流体力学半径（Rh）或流体力学体积（Vh）进行分离，而非利用分子量的差异。分离过程在GPC色谱柱中进行，其柱填充物通常是聚苯乙烯凝胶、玻璃粉或硅胶等多孔物质。由于分子大小的差异，较大的分子无法进入凝胶的空隙，能更快的从色谱柱中被洗脱。

凝胶渗透色谱过程始于单相色谱泵，它推动流动相持续流过系统管路。系统内置脱气机则会去除管路以及溶剂中气体，以提高信号稳定性，降低噪音。进样方式可以是人工进样或自动进样。样品溶液随即被导入GPC色谱柱，开始尺寸分离过程。当样品从色谱柱被洗脱后，它将被一个或多个检测器进行检测，其结果最终被电脑的数据处理系统进行分析。

GPC色谱的分析程度取决于系统检测器的种类与数量。通过选定不同的检测器，按照不同的校准方法可以计算出分子量（MW）、分子量分布（MWD）、特性粘度（IV）、分子密度、水力半径（Rh）与回转半径（Rg）等参数。同时，也可能获得诸如构造、聚集度、支化等大分子结构以及共聚物组成等额外信息。

根据检测系统（检测器的数量及类型）的不同，常见有以下两种实验方法：

1. 传统校准法

2. 三检测联用法（包含了光散射检测器）

其中，传统检测法运用浓度检测器和已校准的GPC柱，能够测量相对分子量和聚合度多分散性。而光散射检测器和浓度检测器联用，能够提供绝对分子量、分子尺寸大小、特性粘度以及分子构成、聚集与支化的信息。