【LNP/AAV】药物载体的生物物理表征方法

更新时间：2022-09-14 点击次数：1323

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【LNP/AAV】脂质载体的生物物理表征方法

利用光散射和量热技术对用于疫苗和治疗的病毒和脂质载体进行生物物理表征

作者：Natalia Markova, Stefan Cairns, Hanna Jankevics-Jones, Michael Kaszuba, Fanny Caputo and Jérémie Parot

近期，马尔文帕纳科应用科学家和挪威SINTEF工业生物技术和纳米医学部的科学家们在Vaccines杂志上发表一篇名为《利用光散射和量热技术对用于疫苗和治疗的病毒和脂质体进行生物物理表征》的文章。

文章对多种用于新型疫苗研发制造的病毒或非病毒载体的表征方法做了专业的介绍。文中所述多种无标记生物物理技术作为互补的分析工具可广泛用于AAV 和LNP的设计、表征和质量控制。且已经成功的用于表征AAV和LNP等药物载体的物理、化学属性，本文将对该项研究做简要介绍。

原文：Vaccines 2022, 10, 49

引言

病毒载体和脂质纳米颗粒（LNP）的结构复杂性影响其功能和药物配方的成功性。这类分子被用作核酸（mRNA，DNA）的递送平台后，如何准确表征这些颗粒变得越来越重要。

在设计、产品开发和过程控制中，理化属性的表征和质量控制需要选择合适、互相补充的分析工具。选择合适的技术来监测样品需要考虑载体的性质、测量处于产品开发的哪个阶段、以及测量的目的。可靠的测量结果和对数据的充分解析依赖深厚的方法学专业知识和全面的数据分析方法。

这里，我们将介绍如何通过综合使用互相补充的、非标记生物物理技术，包括动态光散射（DLS）、多角度光散射（MADLS）、电泳光散射（ELS）、纳米颗粒跟踪分析（NTA）、多检测器SEC和差示扫描量热法（DSC），表征包裹mRNA的病毒载体和LNPs的理化属性。

样品

使用病毒和非病毒载体样品，包括包裹mRNA的脂质纳米颗粒（mRNA-LNPs），脂质体和腺相关病毒（AAV）。

测量内容与检测技术

Zetasizer Ultra

Zetasizer Ultra 纳米粒度及电位分析仪

Zetasizer Ultra 是快速而准确地测量颗粒和分子大小、颗粒电荷以及颗粒浓度的伴侣，其拥有用于高分辨率粒度测量切角度无关的多角度动态光散射（MADLS）技术可以更深入地展现样品的颗粒分布，电泳光散射（ELS）技术可用于测量颗粒和分子的Zeta电位，以显示样品的稳定性和/或团聚倾向性。可以用于rAAV 颗粒的粒径及衣壳滴度的表征。

NanoSight NS300

Nanosight NS300 纳米颗粒跟踪分析仪

采用纳米粒子跟踪分析 (NTA) 技术，马尔文帕纳科NanoSight 这种技术利用光散射和布朗运动的特性，获得纳米颗粒大小 0.01 - 1µm及颗粒浓度，以及实时表征蛋白质聚合(聚集)的解决方案。这使得 NTA成为病毒疫苗研究、纳米毒物学和生物标志物检测以及疾病状态研究的细胞外囊泡、外泌体表征的重要技术。