荧光光谱仪又称荧光分光光度计,是一种定性、定量分析的仪器。其工作原理基于荧光现象。光源发出的紫外光经过单色器得到具有特定波长的激发光,该激发光照射到样品上。物质在吸收激发光的过程中,光子的能量传递给物质分子,使其从较低能级跃迁到较高能级。处于激发态的分子不稳定,会通过辐射跃迁和非辐射跃迁过程返回基态,并发出荧光。这些荧光经过第二单色器(荧光单色器)选择后,被检测器接收并转换为电信号,最后经放大并记录显示。
1、高精度与高灵敏度:利用荧光光谱仪可以准确地测量荧光物质在不同波长下的激发和发射光谱。该设备能够探测非常微弱的光信号,因此具有高的灵敏度。
2、光源:通常采用强度高、稳定性好的连续光源,如氙灯或激光器,以确保对样品的充分激发。
3、单色器:设备中包含两个单色器,一个用于选择激发光的波长,一个用于分离和选择荧光发射的波长。这些单色器可能是光栅或滤光片,确保了良好的单色性和分光精度。
4、样品池设计:样品池用于容纳荧光物质,通过精心设计以降低入射光的影响并提高信号收集效率。
5、检测系统:检测单元通常使用光电倍增管(PMT),它可以将接收到的荧光信号转换为电信号,进而被记录和分析。
6、结构组成:除了上述核心组件外,荧光光谱仪还包含快门单元、偏振片单元等,这些可以根据测试需求选择性使用来获得不同的荧光信息。
7、广泛应用范围:在化学、环境和生物化学等领域有着广泛的应用,尤其是研究小分子和生物大分子相互作用时提供了重要的信息。